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    魯南制藥荊防合劑對蕁麻疹小鼠干預作用的機制研究

    2023年03月20日 09:16
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    來源:***資訊網


     

    蕁麻疹是一種常見的過敏性疾病,其病因較為復雜,臨床上常表現為皮膚出現炎性充血、風團和血管性水腫,給患者造成巨大的健康負擔和經濟壓力。臨床上首選抗組胺藥作為一線治療藥物,雖然在緩解病癥上效果顯著,但極易復發并伴有相關的不良反應。因此,探索新的治療蕁麻疹藥物是臨床亟待解決的課題。中醫治療蕁麻疹歷史悠久,臨床上運用中藥方劑治療蕁麻疹獨具特色。

    荊防合劑源于傳統經典名方“荊防敗毒散”,屬于源自經典、遵古炮制的現代中成藥制劑,具有發汗解表、散風祛濕之效,荊防敗毒散最早來源于明代張時徹的《攝生眾妙方》,臨床研究表明荊防顆粒/合劑能夠有效治療慢性蕁麻疹患者的臨床病癥,降低復發率,F代藥理學研究發現,荊芥、防風、獨活等具有良好的抗炎作用,增強機體免疫力?蒲腥藛T發現荊防合劑抑制蕁麻疹小鼠的炎癥反應機制后又進一步探究其發病機制,為臨床使用荊防合劑治療蕁麻疹提供新的理論。

    1、材料與方法

    將60只雄性昆明小鼠隨機均分為正常組、模型組,荊防合劑低、中、高劑量組,鹽酸西替利嗪片陽性藥組。腹腔注射卵白蛋白與氫氧化鋁混合液建立蕁麻疹小鼠模型。第2次免疫時觀察并記錄小鼠瘙癢情況;HE染色法檢測各組小鼠皮膚組織病理變化;ELISA法檢測各組小鼠血清中IL-1β和TNF-α的水平;免疫組織化學法檢測各組小鼠皮膚組織中NOD樣受體熱蛋白結構域相關蛋白3、IL-1β的表達;Western blot法檢測各組小鼠皮膚組織中NF-κBp65、NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β蛋白的表達水平。

    2、結果

    與模型組相比,荊防合劑低、中、高劑量組以及陽性藥組小鼠搔抓潛伏期均延長、搔抓次數均減少,差異具有統計學意義(P<0.05,P<0.01);

    與陽性藥組相比,荊防合劑高劑量組小鼠搔抓次數減少,差異具有統計學意義(P<0.05)。


    各組小鼠搔抓潛伏期和搔抓次數的比較

    ▼各組小鼠血清中IL-1β和TNF-α的表達水平

    模型組小鼠血清中IL-1β和TNF-α的表達水平升高,表明模型小鼠具有明顯的炎癥反應;

    與模型組相比,荊防合劑低、中、高劑量組以及陽性藥組血清中IL-1β和TNF-α的表達水平降低,且荊防合劑高劑量組效果更為顯著。


    小鼠血清IL-1β和TNF-α的表達

    ▼各組小鼠皮膚組織病理變化

    模型組小鼠表皮結構不完整,顯著增厚,角化不全或是角化過度,顆粒層增厚,真皮腫脹變形,可見明顯的毛細血管擴張及炎細胞浸潤;

    與模型組比較,荊防合劑低、中、高劑量組以及陽性藥組小鼠皮膚組織的病理形態均有不同程度改善,表現為表皮增厚不明顯,真皮網狀層膠原纖維結構相對完整,水腫減輕,偶見血管擴張及周圍炎細胞浸潤,且荊防合劑高劑量組顯著優于陽性藥組。


    各組小鼠皮膚組織病理學變化(HE 染色,×200)

    各組小鼠皮膚組織中NLRP3和IL-1β陽性表達水平

    與正常組相比,模型組小鼠皮膚組織中 NLRP3和IL-1β陽性表達細胞數量增加,差異具有統計學意義(P<0.01);

    與模型組相比,荊防合劑低、中、高劑量組以及陽性藥組NLRP3和IL-1β陽性表達細胞數量減少,差異具有統計學意義(P<0.01)。


    各組小鼠皮膚組織中NLRP3(A)和 IL-1β(B)的陽性表達水平


     

    各組小鼠皮膚組織中p-NF-κB p65、NLRP3、ASC、cleaved caspase-1和IL-1β蛋白的表達

    ▼各組小鼠NF-κB/NLRP3/IL-1β信號通路相關蛋白水平的表達

    與正常組相比,模型組小鼠皮膚組織中NF-κB的磷酸化水平、NLRP3、ASC、cleaved caspase-1和IL-1β蛋白的表達水平均上調,差異具有統計學意義(P<0.05,P<0.01);

    與模型組相比,荊防合劑低、中、高劑量組以及陽性藥組上述蛋白表達水平均下調,具有統計學差異(P<0.05,P<0.01)。


     

    各組小鼠皮膚組織中NF-κB p65、NLRP3、ASC、cleaved caspase-1和IL-1β蛋白的表達水平


     

    各組小鼠皮膚組織中 NF-κB p65、NLRP3、ASC、cleaved caspase-1 和 IL-1β 蛋白的表達水平

    綜上,對于蕁麻疹的治療,荊防合劑可以減輕蕁麻疹瘙癢程度且不同程度的改善病理損傷、抑制蕁麻疹的炎癥反應,其機制與調控NF-κB/NLRP3/IL-1β信號通路相關,該研究充分證實了其在蕁麻疹治療中的優勢特點,有效改善蕁麻疹的癥狀,值得臨床推廣應用。

    參考文獻:

    李市榮,王西雙,程國良,孫成宏,李艷芳,岳茹婧,曾振,姚景春.基于NF-κB/NLRP3/IL-1β信號通路探討荊防合劑對蕁麻疹小鼠干預作用的研究[J/OL].中國中藥雜志:1-8[2022-10-18].


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